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大鼠骨髓源神经干细胞的分离培养及鉴定* |
①青海省人民医院 青海 西宁 810007
②青海大学附属医院
③海南医学院附属医院 |
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Isolation,Culture and Characterization of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells-derived Neural Stem Cells of Wistar Rats |
The People’s Hospital of Qinghai Province,Xining 810007,China |
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摘要 目的:对Wistar 大鼠骨髓源神经干细胞进行分离、培养和鉴定,观察其生长方式和分化特征。方法:运用无血清培养基对Wistar 大鼠骨髓基质细胞进行培养,对分离获得的悬浮生长的神经球采用免疫组织化学法检测CD133 和Nestin 表达情况。用血清诱导其分化,分化7 d 后,采用免疫荧光细胞化学染色方法检测分化后GFAP、Map2、β-tubulin Ⅲ、Galc 的表达情况。结果:大鼠骨髓基质细胞在无血清培养基中,呈悬浮状态生长,形成细胞球,经免疫荧光检测,细胞球呈CD133和Nestin 阳性。将细胞球转入含血清培养基后,转为贴壁生长,经免疫荧光检测大部分已分化细胞呈GFAP 阳性,少部分细胞呈MAP-2、β-tubulin Ⅲ及Galc 阳性。结论:采用含bFGF、EGF 的无血清培养基可培养出呈球状聚集生长、具多向分化潜能的大鼠骨髓源神经干细胞。
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关键词 :
骨髓基质细胞,
神经干细胞,
Wistar 大鼠,
CD133,
Nestin
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基金资助:青海省科技创新能力促进计划项目(2015-ZJ-943Q);青海大学中青年科研基金项目(2014-QYY-6) |
通讯作者:
肖宗宇
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